T-SPOT.TB 在艾滋病并肺結(jié)核診斷中的價值分析

  肺結(jié)核為艾滋病常見、多發(fā)性感染疾病，超過30% 的艾滋病患者死于肺結(jié)核 [1]。當(dāng)前，結(jié)核感染臨床診斷的金標(biāo)準是結(jié)核菌培養(yǎng)，但該方法用時較長，且檢測陽性率較低，無法及時準確的對患者進行診斷[2]。Ｔ細胞斑點試驗 (T-SPOT.TB) 是一種用于結(jié)核感染檢測的新技術(shù)，其原理是檢測機體是否存在分泌IFN-γ 的 Mtb 抗原特異性Ｔ淋巴細胞，進而判斷機體是否感染結(jié)核疾病 [3]。我院自 2011 年 1 月開始使用T-SPOT.TB 對艾滋病患者是否感染肺結(jié)核進行診斷，效果滿意?，F(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料  收集 2011年1月至2014年6月間我院收治的53例艾滋病并肺結(jié)核患者作為觀察組，46 例艾滋病無肺結(jié)核患者作為對照組?；颊呔?jīng)艾滋病初篩和確診試驗確診。觀察組肺結(jié)核的診斷則依據(jù)《肺結(jié)核診斷和治療指南》，且參照患者癥狀、影像學(xué)、細菌學(xué)結(jié)果。觀察組 53 例：男 29 例，女 24 例；年齡26~72 歲，平均(46.1±13.4) 歲。對照組46 例：男 28 例，女 18 例；年齡 28~70 歲，平均 (45.2±14.7) 歲。

1.2 方法  患者取 5ml 外周靜脈血，加入肝素抗凝，分離外周血單個核細胞 (PBMC)。加入 AIM-V 培養(yǎng)液，調(diào)整細胞濃度至 2.5×106/ml。取已包被抗 IFN-γ 抗體微量板，加入 50μl AIM-V 至陰性對照孔，加入50μl 植物血凝素 (PHA) 至 PHA 對照孔，加入 50μl結(jié)核分枝桿菌特異抗原 A(ESAT-6) 至 A 檢測孔，加入 50μl 抗原 B(CFP-10) 至 B 檢測孔。各孔分別加入100μl 2.5×105/ml 的 PBMC 溶液，置于 5%CO2 培養(yǎng)箱中，37℃下培養(yǎng) 20h。用 PBS 洗脫，各孔分別加入50μl 標(biāo)記過的 IFN-γ 抗體，4℃下孵育 1h，PBS 洗脫，加入 50μl 底物進行顯色，室溫下孵育 7min，純水洗滌終止反應(yīng)。對各孔顏色斑點數(shù)進行計數(shù)。判斷標(biāo)準：①當(dāng)陰性對照孔的點數(shù)＜ 6 時，( 檢測孔點數(shù) -陰性對照孔點數(shù) ) ≥６為陽性；②當(dāng)陰性對照孔的點數(shù)≥６時，檢測孔點數(shù) > 陰性對照孔的 2 倍為陽性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 以 SPSS19.0 進行統(tǒng)計學(xué)處理。計數(shù)資料以 χ2 檢驗。P<0.05 差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1兩組陽性率比較  觀察組 T-SPOT.TB 試驗陽性率為 81.1%(43/53)，對照組 T-SPOT.TB 試驗陽性率為 15.2%(7/46)。兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=42.802，P=0.000)。

2.2T-SPOT.TB 診斷艾滋病并肺結(jié)核的價值 對 T-SPOT.TB 診斷艾滋病并肺結(jié)核的價值進行了分析：靈敏度為 86.0%，特異度為 79.6%，陽性預(yù)測值為81.1%，陰性預(yù)測值為 84.8%。

2.3CD4+ 計 數(shù) 對 T-SPOT.TB 陽 性 率 的 影 響將觀察組患者依據(jù) CD4+ 水平分為兩組。CD4+ 計數(shù)

≥ 200/μl 患 者 18 例，T-SPOT.TB 試 驗 陽 性 率 為83.3%(15/18) ；CD4+ 計數(shù) <200/μl 患者 35 例，T-SPOT.TB 試驗陽性率為 74.3%(26/35)。兩組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義 (χ2=0.577，P=0.448)。

3 討論

肺結(jié)核臨床為艾滋病患者常見的機會感染疾病，同時也是艾滋病患者死亡的原因。因此，對肺結(jié)核進行及時、準確的診斷，并制定有效的治療及抗逆轉(zhuǎn)錄病毒方案，對患者預(yù)后非常重要。但肺結(jié)核患者臨床缺乏典型影像學(xué)表現(xiàn)，痰細菌檢測的陽性率低，臨床檢測常出現(xiàn)漏診和誤診 [4]。因此，有效的檢測方法一直受廣大醫(yī)師的關(guān)注。T-SPOT.TB 試驗是由酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)發(fā)展起來的結(jié)核感染檢測新技術(shù)，檢測原理為：患者發(fā)生結(jié)核感染后，分泌產(chǎn)生記憶性的 T 淋巴細胞，給予結(jié)核相關(guān)抗原的刺激，記憶性 T 淋巴細胞可快速轉(zhuǎn)增殖為效應(yīng)性的Ｔ淋巴細胞，并會分泌出IFN-γ，因此對 IFN-γ 的數(shù)目進行檢測，就可以判定機體是否發(fā)生結(jié)核感染 [5]。國內(nèi)外研究顯示，普通人群 T-SPOT.TB 試驗對結(jié)核感染診斷的準確率超過了 90%[6-8]。童學(xué)成等 [9] 的研究中，使用 T-SPOT.TB 試驗對 45 例并發(fā)肺結(jié)核艾滋病患者進行了診斷，其診斷準確率達到了 80%，顯著性高于未合并肺結(jié)核患者的 13.3%。陳仁芳等 [10] 使用 T-SPOT.TB 試驗對 26例并活動性肺結(jié)核艾滋病患者進行了診斷，其準確率達到了 92.3%，顯著高于未合并活動性肺結(jié)核患者的16.7%。這些結(jié)果提示了，T-SPOT.TB 試驗可對艾滋病患者是否感染結(jié)核進行診斷。

本研究對合并肺結(jié)核和未合并肺結(jié)核的艾滋病患者進行了 T-SPOT.TB 試驗，結(jié)果顯示：觀察組陽性率為81.1%(43/53) 顯著高于對照組的 15.2%(7/46)。本組進一步研究了 T-SPOT.TB 對艾滋病并肺結(jié)核的診斷價值，結(jié)果顯示：T-SPOT.TB 的靈敏度為 86.0%，特異度為 79.6%，陽性預(yù)測值為 81.1%，陰性預(yù)測值為84.8%。本組研究結(jié)果提示，T-SPOT.TB 可有效對艾滋病并肺結(jié)核進行診斷，具有較高的靈敏度和特異度。

在進一步研究中，我們探討了機體免疫狀態(tài)診斷結(jié)果的影響，發(fā)現(xiàn)：CD4+ 計數(shù)≥ 200/μl 患者診斷陽性率為83.3%(15/18) 與 CD4+ 計數(shù) <200/μl 患者診斷陽性率74.3%(26/35) 比較，無明顯差異。提示了機體免疫狀態(tài)對檢測結(jié)果影響不大。綜上所述，T-SPOT.TB 試驗可對艾滋病并肺結(jié)核進行有效診斷，具有較高的敏感度和特異度。

參考文獻：

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[9]童學(xué)成 , 陳國春 , 濮翔科 , 等 . 結(jié)核感染Ｔ細胞斑點試驗對艾滋病合并肺結(jié)核的臨床診斷價值 [J]. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志 ,2014,24(14): 3632-3634.

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